ELISA試劑盒就酶標(biāo)抗體自身而言，它的有用作業(yè)濃度是指與其相應(yīng)抗原包被的載體作實驗時，能得到陽性反響的zui高稀釋度。例如某一HRP：抗人IgG制劑標(biāo)明的作業(yè)濃度為1:5000，ELISA試劑盒表明該制劑經(jīng) 1:5000稀釋后，在與人IgG包被的固相作ELISA實驗時，將發(fā)作陽性反響。但在用于具體的ELISA檢查中，酶標(biāo)的zui適作業(yè)濃度受到固相載體的性質(zhì)、包被抗原或抗體的純度以及整個檢查系統(tǒng)如標(biāo)本、反響溫度和時刻等的影響，因而有必要在實際測定條件下進(jìn)行"滴配"挑選能到達(dá)高敏感度的zui大稀釋度作為試劑盒中的作業(yè)濃度。 
還有有的包被原也許不是蛋白，ELISA試劑盒關(guān)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，ELISA檢查試劑盒參加生物素化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實，ELISA檢查試劑盒已擴(kuò)展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。這種物理吸附長短特異性的，ELISA試劑盒受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體外表。ELISA檢查試劑盒小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。
物制得后，在用作ELISA試劑盒前需要斷定其恰當(dāng)?shù)淖鳂I(yè)濃度。運(yùn)用過濃的物，既不經(jīng)濟(jì)，又可使本底增高；物的濃度過低，則又影響檢查的敏感性。所以有必要對物的濃度予以挑選。zui適的作業(yè)濃度就是指物稀釋至這一濃度時，能保護(hù)一個低的本底，并取得測定的靈敏度，到達(dá)zui合適的測定條件和測定費用的節(jié)約。